技術文章
當前位置：
主頁 >
技術文章 > 細胞培養基pH值改變的原因及解決辦法
細胞培養基pH值改變的原因及解決辦法
更新時間：2022-04-12 點擊次數：11577
pH值升高都有哪些原因？
①隨著培養基開蓋時間的增長，pH值會不斷升高；
---培養基中CO2揮發，導致溶液堿性升高。
②培養基存儲條件不合適；
③操作時間過長。
如何解決pH值升高的問題？
①*培養基盡量現配現用，2~8℃下保存一周內使用完；
②培養基在2~8℃下避光保存；
③避免操作時間過長。操作時間快速、減少同時進行的實驗數量。
pH值降低都有哪些原因？
①在細胞生長過程中，產生細胞代謝產物乳酸，乳酸蓄積，pH值通常會下降；
②培養瓶蓋擰得過緊；
---細胞代謝產生的CO2無法溢出，溶解于培養基中導致酸性變強。
③NaHCO3緩沖系統緩沖能力不夠；
④細菌、酵母或真菌污染等。
如何解決pH值降低的問題？
①及時傳代、提高傳代比例或降低血清量；
②適當松開瓶蓋；
③增加培養液中NaHCO3濃度或減少培養箱內CO2濃度（NaHCO3含量在2.0g/L到3.7g/L之間時，對應的CO2濃度為5~10%）；
④若是微生物污染造成的，需及時丟棄培養基，并對操作、培養空間進行消毒處理。
在什么情況下選擇HEPES緩沖體系呢？
在開放式培養條件下（非5%CO2的培養環境），細胞代謝產生的CO2迅速溢出，pH迅速升高，使用HEPES緩沖液體系，可以防止培養基pH值迅速變動。
